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1、測試背(bei)景
細(xi)胞(bao)(bao)(bao)是生物學研究(jiu)的(de)(de)基(ji)本單(dan)元,獲取單(dan)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)懸(xuan)浮液對于(yu)研究(jiu)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)的(de)(de)特性(xing)和功能(neng)(neng)具有重(zhong)要(yao)意義。傳(chuan)統的(de)(de)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)分(fen)離方(fang)法往往需要(yao)長(chang)時間的(de)(de)操作,且(qie)容易導(dao)致細(xi)胞(bao)(bao)(bao)損(sun)傷和死亡(wang)。超(chao)聲波(bo)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)粉碎機(ji)因其快速、高效且(qie)非接(jie)(jie)觸的(de)(de)特點,成(cheng)為獲得(de)單(dan)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)懸(xuan)浮液的(de)(de)理(li)想選(xuan)擇。我司基(ji)于(yu)以上需求,對非接(jie)(jie)觸式超(chao)聲波(bo)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)粉碎機(ji)SCIENTZ 08-IIIC(以下簡稱08-IIIC)這(zhe)款儀器在細(xi)胞(bao)(bao)(bao)破碎和單(dan)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)獲得(de)方(fang)面的(de)(de)效果和性(xing)能(neng)(neng)進行測試。
2、試(shi)驗材料(liao)
2.1樣品
本研究選用活力良好、規(gui)格整(zheng)齊、雙(shuang)殼完整(zheng)的縊蟶(cheng)個體取(qu)肌肉(rou)(rou)部(bu)分、豬的部(bu)分肌肉(rou)(rou)組織(zhi)及脂肪組織(zhi)作為實驗對象。
2.2儀(yi)器與試劑
SCIENTZ 08-IIIC非接觸式超聲波細(xi)胞粉碎機、顯微鏡、HSC-2015L離心機、SLC-2006恒溫槽、膠原酶、磷酸緩沖鹽溶液、離心管。
3、測試方(fang)案
1. 將三種(zhong)不(bu)同組織各(ge)剪成約30 mg,分別(bie)放入(ru)裝有冷PBS的1.5 mL離(li)心(xin)管中,洗(xi)凈后,在(zai)每(mei)個離(li)心(xin)管中加入(ru)適量的膠原酶(mei)。
2. 設置(zhi)超聲頻率(lv)(lv)、功率(lv)(lv)、工作(zuo)時間(jian)及恒溫(wen)槽溫(wen)度(du)。
3. 將超聲破碎后(hou)的組織簡短(duan)離(li)心,取(qu)上清液進行鏡(jing)檢。
4、實驗結果(guo)與分析
圖1 超聲波細胞破碎儀(yi)獲得(de)動(dong)物組織樣品(pin)單細胞電(dian)鏡檢測(ce)
Fig. 1 Ultrasonic cell breaker to obtain single-cell electron microscope detection of razor clam muscle tissue samples
經超(chao)聲打(da)斷(duan)后的(de)組織上清液中可(ke)見大量(liang)完整動物(wu)體細胞,有少量(liang)未去除(chu)雜質。
5、結(jie)論
非(fei)接觸(chu)式超聲(sheng)波(bo)細(xi)胞粉碎機(ji)SCIENTZ 08-III能夠(gou)作為(wei)一種有效的方法用于獲得動物組織樣本中(zhong)的單細(xi)胞。