超聲細菌分散計數儀助力結核桿菌藥敏試驗

一、背景介紹

結核分枝桿菌耐藥性的產生及其引起的耐藥結核病的流行，已經成為國內外高度關注的嚴重影響結核病防治效果的問題。開展藥物敏感性試驗和耐藥性監測，對了解結核分枝桿菌的耐藥狀況、指導臨床治療、以及研究耐藥發生機制、有效控制耐藥結核病的流行具有非常重要的意義。

體(ti)外抗菌藥(yao)(yao)物(wu)(wu)敏(min)(min)感性試(shi)驗簡稱藥(yao)(yao)敏(min)(min)試(shi)驗（AST），是(shi)指在體(ti)外測定藥(yao)(yao)物(wu)(wu)抑菌或殺菌能(neng)力的(de)試(shi)驗。藥(yao)(yao)敏(min)(min)實驗可以相對快速有效(xiao)地檢測病原(yuan)(yuan)菌對各(ge)種(zhong)抗菌藥(yao)(yao)的(de)敏(min)(min)感性，其目的(de)是(shi)了解病原(yuan)(yuan)微生物(wu)(wu)對各(ge)種(zhong)抗生素(su)(su)的(de)敏(min)(min)感程度，以指導臨床(chuang)合理選用(yong)抗生素(su)(su)藥(yao)(yao)物(wu)(wu)的(de)微生物(wu)(wu)學試(shi)驗。

固體培養(yang)法(fa)(fa)這是(shi)目前結核病實驗室常用(yong)的(de)細菌(jun)(jun)學(xue)藥(yao)(yao)敏試驗方(fang)法(fa)(fa)，包括比例(li)法(fa)(fa)( method of proportion，MOP) 和(he)絕對濃度(du)法(fa)(fa)，分別由法(fa)(fa)國學(xue)者G．Canetti 和(he)德國學(xue)者G．Meissner 于1963 年首先(xian)提出。比例(li)法(fa)(fa)是(shi)世界衛生組織推薦的(de)藥(yao)(yao)敏試驗方(fang)法(fa)(fa)，也是(shi)目前我(wo)國流行病學(xue)監測和(he)耐(nai)多藥(yao)(yao)結核病規劃管(guan)理項目所(suo)采取的(de)方(fang)法(fa)(fa)。比例(li)法(fa)(fa)是(shi)將結核分枝桿(gan)菌(jun)(jun)菌(jun)(jun)液稀釋成不(bu)同的(de)濃度(du)，接種在相同濃度(du)的(de)含藥(yao)(yao)羅氏培養(yang)基上，通過計算耐(nai)藥(yao)(yao)菌(jun)(jun)的(de)比例(li)，來判(pan)斷細菌(jun)(jun)是(shi)否耐(nai)藥(yao)(yao)。

在我國，各省、直轄(xia)市、自治區疾病(bing)(bing)預防控制(zhi)中心(xin)及(ji)胸科/傳(chuan)染病(bing)(bing)醫院是開展結核病(bing)(bing)研究和藥敏(min)試(shi)驗的(de)(de)主要(yao)單位。收集培養的(de)(de)結核桿菌(jun)樣本，要(yao)進行后續(xu)(xu)的(de)(de)藥敏(min)試(shi)驗，細菌(jun)樣品的(de)(de)分(fen)散尤為關鍵。傳(chuan)統方法(fa)通(tong)常是通(tong)過挑取培養的(de)(de)細菌(jun)進行研磨分(fen)散，反復加液比濁，直至將(jiang)所(suo)有的(de)(de)樣本均調節到同一麥氏濁度，然(ran)后進行后續(xu)(xu)的(de)(de)藥敏(min)試(shi)驗。

超聲細菌(jun)分散計數儀是一(yi)款基于超聲分散(san)和(he)光電濁(zhuo)度(du)檢測(ce)原理(li)的菌液(ye)前處(chu)理(li)儀器。該儀器與傳統的手(shou)工分散(san)方法相比，它能更快更好(hao)地實現菌落分散(san)和(he)濁(zhuo)度(du)檢測(ce)一(yi)體化，同時智(zhi)(zhi)能提示(shi)稀(xi)釋到標準麥氏(shi)濁(zhuo)度(du)菌懸液(ye)所(suo)需的稀(xi)釋體積(ji)。是一(yi)款高效率(lv)解(jie)放雙手(shou)的同時還不(bu)影響菌株活(huo)性和(he)藥敏試驗結果的智(zhi)(zhi)能儀器，在(zai)微生物實驗前處(chu)理(li)中(zhong)具有較高的應用(yong)價(jia)值(zhi)。

二、超聲分散處理結(jie)核桿菌(jun)的優點(dian)

1. 工作原理(li)

通(tong)過(guo)壓電陶瓷換能(neng)器將高(gao)頻電能(neng)轉化(hua)為超聲(sheng)波(bo)聲(sheng)能(neng)，由超聲(sheng)波(bo)擊錘將超聲(sheng)波(bo)聲(sheng)能(neng)傳(chuan)遞(di)到比(bi)(bi)(bi)色(se)皿，在不(bu)損傷樣品的(de)前提下，實(shi)現(xian)比(bi)(bi)(bi)色(se)皿中成團(tuan)細菌的(de)超聲(sheng)波(bo)均勻分散，然后(hou)光源產生的(de)光線透過(guo)比(bi)(bi)(bi)色(se)皿照在傳(chuan)感器上，通(tong)過(guo)傳(chuan)感器讀(du)取透射光的(de)強度(du)，將樣品與(yu)標準物(wu)質對比(bi)(bi)(bi)，實(shi)現(xian)樣品麥(mai)(mai)氏濁度(du)測量，并(bing)基(ji)于樣品麥(mai)(mai)氏濁度(du)和算法給出稀釋(shi)到目標濁度(du)所需(xu)加液(ye)體積，并(bing)對樣品菌落(luo)數進行初步估計。

2. 菌液制備過程對比(bi)

3.分散效果對比

三、應(ying)用領(ling)域

1. 水處理、固液(ye)分(fen)散、溶(rong)液(ye)中顆粒的解團(tuan)聚實驗；

2. 分枝桿菌、腸桿菌、葡萄球菌等微生(sheng)物藥敏試(shi)驗(yan)的菌懸液制備(bei)；

3. 生物制品(pin)研發及細(xi)菌培養分散(san)及濁度(du)檢測實驗；

4. 食品微(wei)(wei)生物限(xian)度(du)等(deng)檢測實驗。

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參考文獻(xian)：

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