超聲細菌分散計數儀助力結核桿菌藥敏試驗

一、背景介(jie)紹

結核分枝桿菌耐藥性的產生及其引起的耐藥結核病的流行，已經成為國內外高度關注的嚴重影響結核病防治效果的問題。開展藥物敏感性試驗和耐藥性監測，對了解結核分枝桿菌的耐藥狀況、指導臨床治療、以及研究耐藥發生機制、有效控制耐藥結核病的流行具有非常重要的意義。

體外抗(kang)(kang)菌(jun)藥物(wu)(wu)敏(min)感(gan)性(xing)試(shi)(shi)驗(yan)(yan)簡稱藥敏(min)試(shi)(shi)驗(yan)(yan)（AST），是指在體外測定藥物(wu)(wu)抑菌(jun)或(huo)殺菌(jun)能力的(de)試(shi)(shi)驗(yan)(yan)。藥敏(min)實驗(yan)(yan)可以相(xiang)對(dui)快速有效地檢測病原(yuan)菌(jun)對(dui)各種(zhong)抗(kang)(kang)菌(jun)藥的(de)敏(min)感(gan)性(xing)，其目的(de)是了解病原(yuan)微生物(wu)(wu)對(dui)各種(zhong)抗(kang)(kang)生素的(de)敏(min)感(gan)程度，以指導臨床合理(li)選用抗(kang)(kang)生素藥物(wu)(wu)的(de)微生物(wu)(wu)學試(shi)(shi)驗(yan)(yan)。

固體培養(yang)法(fa)這是(shi)(shi)目前結核病實驗(yan)(yan)室(shi)常用的(de)細菌學藥(yao)(yao)敏(min)試驗(yan)(yan)方(fang)法(fa)，包括比(bi)例法(fa)( method of proportion，MOP) 和(he)絕對濃(nong)(nong)度(du)法(fa)，分別由法(fa)國學者G．Canetti 和(he)德國學者G．Meissner 于1963 年首先提出(chu)。比(bi)例法(fa)是(shi)(shi)世界(jie)衛(wei)生組織推薦的(de)藥(yao)(yao)敏(min)試驗(yan)(yan)方(fang)法(fa)，也(ye)是(shi)(shi)目前我國流行(xing)病學監測和(he)耐多藥(yao)(yao)結核病規劃管(guan)理項(xiang)目所采取的(de)方(fang)法(fa)。比(bi)例法(fa)是(shi)(shi)將(jiang)結核分枝桿菌菌液稀釋成(cheng)不同的(de)濃(nong)(nong)度(du)，接種(zhong)在相同濃(nong)(nong)度(du)的(de)含藥(yao)(yao)羅氏培養(yang)基上，通過計算耐藥(yao)(yao)菌的(de)比(bi)例，來判斷細菌是(shi)(shi)否耐藥(yao)(yao)。

在我國，各省、直(zhi)(zhi)轄市、自(zi)治(zhi)區疾病(bing)預防控制(zhi)中(zhong)心及胸科/傳染病(bing)醫(yi)院是開展結(jie)核病(bing)研究和藥(yao)(yao)敏(min)試驗的(de)(de)主要(yao)(yao)單位。收集培(pei)養(yang)的(de)(de)結(jie)核桿(gan)菌樣(yang)本，要(yao)(yao)進行(xing)后續的(de)(de)藥(yao)(yao)敏(min)試驗，細菌樣(yang)品(pin)的(de)(de)分(fen)散尤為(wei)關鍵。傳統方法通(tong)常是通(tong)過挑取(qu)培(pei)養(yang)的(de)(de)細菌進行(xing)研磨分(fen)散，反復加(jia)液比濁，直(zhi)(zhi)至將所有的(de)(de)樣(yang)本均(jun)調節到同(tong)一麥氏濁度，然后進行(xing)后續的(de)(de)藥(yao)(yao)敏(min)試驗。

超聲細菌分(fen)散(san)計數儀是一款基(ji)于(yu)超(chao)聲(sheng)分(fen)散(san)和光電濁(zhuo)度檢(jian)測原理的(de)(de)菌(jun)液前處理儀(yi)器。該儀(yi)器與傳統的(de)(de)手工(gong)分(fen)散(san)方法相比(bi)，它能更快(kuai)更好地(di)實現菌(jun)落分(fen)散(san)和濁(zhuo)度檢(jian)測一體化，同時智能提示稀釋到標(biao)準麥氏(shi)濁(zhuo)度菌(jun)懸(xuan)液所需的(de)(de)稀釋體積。是一款高效率解放(fang)雙手的(de)(de)同時還不影響(xiang)菌(jun)株活性和藥敏試驗結果(guo)的(de)(de)智能儀(yi)器，在微生物實驗前處理中具(ju)有較高的(de)(de)應用價值(zhi)。

二、超聲分散處(chu)理結核桿菌的優點

1. 工作原(yuan)理

通過壓電(dian)(dian)陶(tao)瓷換能器將高頻電(dian)(dian)能轉化為超聲(sheng)(sheng)波(bo)(bo)聲(sheng)(sheng)能，由超聲(sheng)(sheng)波(bo)(bo)擊(ji)錘將超聲(sheng)(sheng)波(bo)(bo)聲(sheng)(sheng)能傳遞到比(bi)(bi)色(se)皿(min)，在不損傷樣(yang)品的前提下(xia)，實現比(bi)(bi)色(se)皿(min)中(zhong)成團細菌的超聲(sheng)(sheng)波(bo)(bo)均勻(yun)分散(san)，然后光(guang)源產生的光(guang)線(xian)透過比(bi)(bi)色(se)皿(min)照在傳感(gan)器上，通過傳感(gan)器讀取透射光(guang)的強度，將樣(yang)品與(yu)標(biao)準物質對(dui)比(bi)(bi)，實現樣(yang)品麥(mai)氏濁(zhuo)度測(ce)量，并基于(yu)樣(yang)品麥(mai)氏濁(zhuo)度和算法(fa)給(gei)出稀(xi)釋到目標(biao)濁(zhuo)度所(suo)需(xu)加(jia)液體積，并對(dui)樣(yang)品菌落數(shu)進行初(chu)步估計。

2. 菌液制備過程對比

3.分(fen)散(san)效(xiao)果(guo)對(dui)比(bi)

三、應用領域

1. 水處理(li)、固液分散、溶液中顆粒的(de)解(jie)團聚實驗；

2. 分(fen)枝桿菌、腸(chang)桿菌、葡萄球菌等微(wei)生物藥敏試(shi)驗的菌懸液制備；

3. 生(sheng)物制品研發及細菌(jun)培養(yang)分散(san)及濁度(du)檢測(ce)實驗(yan)；

4. 食品微(wei)生(sheng)物限度等(deng)檢測實(shi)驗(yan)。

了解新芝超聲細菌分散計數儀：//lovehlp.cn/products/p852.html

參考文獻：

1.   穆成. 結核分枝桿菌藥敏試驗表型檢測法的新進展[J]. 中國衛生檢驗雜志, 2015, 25(10):1678-1680.

2.    郭(guo)明日, 張(zhang)麗霞(xia). 非結核分枝桿(gan)菌病實(shi)驗(yan)室診斷技術及藥(yao)敏試(shi)驗(yan)研究進展[J]. 淮海(hai)醫藥(yao), 2017, 35(2): 246-249. 

3.    郭以河(he). MTT法體外藥敏試(shi)驗研究(jiu)進展及臨床(chuang)應用[J]. 東南(nan)國防(fang)醫(yi)藥, 2005, 7(1): 77-78.