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GP-3000基因導入儀采用整機一體化設計,操作簡單,顯示直觀,主要是利用電轉化來將DNA轉入感受態細胞、動植物細胞、酵母細胞中。與其它方法相比,電轉化法具有高重復性,高效率、操作簡易、可定量控制等優點,已經成為不可或缺的分子生物學基本技術。
型號 | GP-3000 |
脈沖形式 | 指數衰減和方波 |
高壓輸出電壓 | 401-3000V |
低壓輸出電壓 | 50-400V |
高壓電容 | 10-60μF,以1μF步進(推薦10μF、25μF、35μF、50μF、60μF) |
低壓電容 | 25-1575μF,以1μF步進(推薦以25μF步進) |
并接電阻 | 100Ω-1650Ω,以1Ω步進(推薦以50Ω步進) |
電源電壓 | 100-240VAC50/60HZ |
連續放電個數 | 1-9 |
放電及間隔時間 | 0.1ms-999ms,增量0.1ms |
控制方式 | 微電腦控制 |
時間常數 | 帶RC時間常數,可調節 |
主機外形尺寸 | 30*20*20cm |
主機凈重 | 4.5kg |
包裝尺寸 | 58*36*25cm |
產品說明
GP-3000基因導入儀由儀器主機、基因導入杯及專用連接線等組成。主要是利用電轉化來將DNA轉入感受態細胞、動植物細胞、酵母細胞中。與其它方法相比,基因導入儀法具有高重復性,高效率、操作簡易、可定量控制等優點,同時,電轉沒有基因毒性,已經成為不可缺少的分子生物學基本技術。
工作原理
細胞電轉染(電轉),也叫細胞電穿孔 (electroporation),是把外源大分子物質DNA、RNA、siRNA、蛋白質等以及一些小分子導入細胞膜內部的重要方法。
在瞬間強大電場的作用下,溶液中細胞的細胞膜具有了一定的通透性,帶電的外源物質以類似電泳的方式進入細胞膜。由于細胞膜磷脂雙分子層的電阻很大,細胞外部電流場產生的細胞兩極電壓都被細胞膜承受,細胞質內分到的電壓可以忽略不計,細胞質內部幾乎沒有電流,因此也決定了正常范圍內的電轉過程中細胞毒性很小。電場使DNA等物質進入細胞膜后只能停止在細胞膜附近,隨后細胞本身的機制可以允許這些物質到細胞核等處。
由于電轉技術依靠的是物理方法,細胞表面的分子特性對電轉影響比較小。相比化學轉染方法和病毒載體轉染方法,電轉可以用在所有的細胞種類上,而且容易定量控制。
細胞電轉電場圖 1 細胞膜近似絕緣體,細胞附近電轉液中電流扭曲。 2 在串聯電路中電阻越大分到電壓越大,細胞兩端電壓基本都落在兩端細胞膜上。 3 只有一個細胞端面電轉有效。 4 細胞質內分到電壓很小,DNA電轉進入細胞膜后馬上停止,后續靠細胞本身機制慢速擴散。 5 細胞核兩端電壓及其微小,微小的電壓又落在核膜上,核內部完全沒有電壓,電轉沒有基因毒性。 |
應用領域
? 細菌、酵母及其他微生物的電轉化 | ? 導入藥物、蛋白、抗體等分子對細胞的結構和功能進行研究 | ? 細胞雜交、融合基因導入 |
? 導入標記基因起到標記、指示的作用 | ? 哺乳動物細胞的轉染、植物組織和原生質體的轉染 |
產品特點
? 效率高 轉化時間短、轉化率高、重復性優異 | ? 智能儲存:可存儲實驗參數,方便用戶調取 |
? 控制精準 采用微處理器控制的脈沖放電 | ? 外形美觀 整機一體化設計,顯示直觀,操作簡單 |
實驗舉例
1、LI J等人基于高通量篩選分析p53–MDM2蛋白相互作用的小分子抑制劑的研究結果。[1] | 2、ZHANG S Y等人發現和鑒定一個獨特的G蛋白偶聯受體119激動劑的研究結果。[2] | |
1、LI J, ZHANG S, GAO L, et al. A cell-based high-throughput assay for the screening of small-molecule inhibitors of p53-MDM2 interaction [J]. Journal of biomolecular screening, 2011.
2、ZHANG S Y, LI J, XIE X. Discovery and characterization of novel small molecule agonists of G protein-coupled receptor 119 [J]. Acta pharmacologica Sinica, 2014.
不同菌種的轉化率
備注:因各單位實驗條件不盡相同,以上實驗參數僅供參考