DNA重組虛擬實驗
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【標題頁】
生物化學與分子生物學虛擬實驗室
點擊按鈕:基礎知識(以下為一組):
1實驗目的、2實驗原理、3注意事項、4關鍵試劑與實驗器材
虛擬實驗(以下為一組):
1、2、3
【實驗目的】
實驗目的:
掌握基因重組的基本原理和基本操作技術。
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【實驗原理】
實驗原理:
基因重組是一個操作過程。是利用酶學的方法,將外源性的DNA與載體DNA結合成一具有自我復制能力的DNA分子,繼而通過轉化或轉染宿主細胞,達到改變宿主細胞的遺傳性狀的目的。
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【注意事項】
基因載體作為外源基因導入細胞的工具,一定要有多克隆的位點,篩選標記,復制的起始位點等。
酶切反應時加入限制酶的體積不超過反應總體積的1/10,避免限制酶活性受到甘油的影響。稀釋以免酶失活。
DNALigase對熱敏感,容易失活。使用時請放置冰上,用后立即置中冷凍保存。
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【關鍵試劑與實驗器材】
關鍵試劑:限制性內切酶; 堿性磷酸酶; DNA連接酶等。
實驗器材:振蕩器、恒溫槽、移液架、微量取液器、盛有消毒槍頭的塑料盒等。
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